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LPL双切口酶质粒(h) | sc-400751-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
LPL双切口酶质粒(h2) | sc-400751-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
LPL 编码脂蛋白脂肪酶(lipoprotein lipase),这是一种分泌型并锚定于血管内皮表面的酶,可水解循环中的乳糜微粒和极低密度脂蛋白(VLDL)内的甘油三酯,释放游离脂肪酸供肌肉与脂肪组织摄取。该活性协同调控脂质摄取、储存与氧化等程序,并与涉及载脂蛋白以及肝素硫酸蛋白聚糖的脂质转运和脂蛋白重塑过程相互交叉。由于在富含甘油三酯的脂蛋白清除中居于核心地位,LPL 被广泛用于研究代谢稳态以及与血脂异常相关的表型。LPL 功能或调控的改变与高甘油三酯血症及其下游心代谢风险生物学相关,因此常作为脂质代谢机制研究的重点靶点。
LPL 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 LPL 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LPL内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏LPL的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了LPL基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。