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LOXL3双切口酶质粒(h) | sc-402967-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
LOXL3(lysyl oxidase like 3)编码一种铜依赖性胺氧化酶,可催化赖氨酸残基的氧化脱氨反应,促进胶原蛋白和弹性蛋白的共价交联,从而塑造细胞外基质的结构。通过调控基质刚度与重塑过程,LOXL3 影响细胞黏附、迁移和组织完整性,并与纤维化、创伤修复以及上皮–间质可塑性相关通路发生交叉。LOXL3 表达或活性失调与多种疾病情境下细胞外基质稳态改变有关,包括肿瘤微环境重塑和纤维化病理。在人源细胞模型中,LOXL3 常用于研究其在胶原成熟、力学信号转导以及微环境依赖性信号传递中的作用。
LOXL3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 LOXL3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LOXL3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏LOXL3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了LOXL3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。