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LOX双切口酶质粒(m) | sc-421456-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
LOX双切口酶质粒(m2) | sc-421456-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Lox 基因编码赖氨酰氧化酶(LOX)。LOX 是一种分泌型、铜依赖性的胺氧化酶,可催化胶原和弹性蛋白中赖氨酸残基的氧化脱氨作用,促进共价交联并推动细胞外基质(ECM)成熟。LOX 活性会塑造组织的硬度与结构,从而影响细胞黏附、迁移以及与整合素信号和黏着斑动态相关的力学传导通路。在模型系统中,LOX 依赖的 ECM 重塑失调与纤维化过程、异常伤口修复以及与肿瘤进展相关的微环境改变有关。作为一种基质修饰酶,LOX 常被用于研究其对基质细胞生物学、血管完整性,以及对炎症或缺氧所致重塑反应的影响。
LOX 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Lox 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Lox内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Lox的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Lox基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。