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LKB1双切口酶质粒(m) | sc-423192-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
LKB1双切口酶质粒(m2) | sc-423192-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Stk11 基因编码丝氨酸/苏氨酸激酶 LKB1。LKB1 是细胞能量稳态与极性调控的核心调节因子,可激活 AMPK 以及一大类 AMPK 相关激酶。通过这一信号轴,LKB1 协调代谢应激反应、线粒体功能、自噬和细胞周期控制,并通过极性复合体参与维持上皮结构。LKB1 依赖通路的紊乱与生长控制异常及代谢重编程相关,使 Stk11 成为肿瘤抑制基因生物学研究中的关键节点。在小鼠研究体系中,对 LKB1 的扰动被广泛用于探究组织特异性的代谢调控、干细胞行为以及对微环境应激的适应。
LKB1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Stk11 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Stk11内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Stk11的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Stk11基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。