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LHX1双切口酶质粒(h) | sc-403100-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
LHX1双切口酶质粒(h2) | sc-403100-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
LHX1(LIM homeobox 1)编码一种含 LIM 结构域的同源盒转录因子,在胚胎发育过程中协调组织模式形成与细胞命运决定。在人类细胞中,LHX1 通过与 DNA 结合并与调控染色质及转录网络的辅因子协作,来调控谱系特异性的转录程序。它参与包括体轴模式建立和泌尿生殖系统指定在内的多种发育过程,因此其活性与调控分化与形态发生的信号通路密切相关。LHX1 表达失调与先天性异常有关,并在部分癌症中也有报道,使其成为研究疾病情境下转录调控机制的重要对象。
LHX1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 LHX1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LHX1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏LHX1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了LHX1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。