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LHR双切口酶质粒(h) | sc-400750-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
LHR双切口酶质粒(h2) | sc-400750-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
LHCGR 编码黄体生成素/绒毛膜促性腺激素受体(LHR),这是一种对促性腺激素有反应的 G 蛋白偶联受体(GPCR),在类固醇生成细胞中调控生殖内分泌。配体结合后可激活 Gs/腺苷酸环化酶信号通路,提高 cAMP 水平并启动 PKA 依赖的转录程序,从而控制类固醇生物合成、排卵以及莱迪希细胞的雄激素生成;同时还可耦联至 PLC/PKC 与 MAPK 等通路,调节细胞增殖与分化。LHR 信号与性腺发育及代谢网络相互整合,影响 STAR 以及 CYP 家族等类固醇生成酶的表达。LHCGR 的失调或遗传变异与性发育异常、不同的生育力表型,以及与激素相关的卵巢和睾丸病理生理改变有关,这些都与机制研究模型密切相关。
LHR 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 LHCGR 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LHCGR内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏LHCGR的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了LHCGR基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。