Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Lck Antibody (28): sc-135971. Western blot analysis of Lck expression in Jurkat whole cell lysate.
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Lck双切口酶质粒(h): sc-400434-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Lck 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Lck双切酶质粒（h）和Lck双切酶质粒（h2）编码针对LCK的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Lck: sc-433，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Lck双切口酶质粒(h) | sc-400434-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Lck双切口酶质粒(h2) | sc-400434-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
LCK 编码 Lck（一种 Src 家族酪氨酸激酶），其通过磷酸化 ITAM 基序并协调招募 ZAP70 及衔接蛋白复合体，启动 T 细胞受体下游信号传导。通过这些近端事件，Lck 调控 MAPK/ERK、PI3K–AKT 以及 NF-κB/NFAT 等通路的激活，从而控制 T 细胞的发育、激活、细胞因子产生以及免疫突触形成。LCK 活性或表达失调与淋巴细胞信号状态改变相关，并被认为参与免疫失衡及血液系统恶性肿瘤的生物学过程。作为受体近端磷酸化网络中的关键节点，Lck 在人类免疫细胞的磷酸化蛋白质组学、激酶信号研究与功能基因组学中被广泛研究。
Lck 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 LCK 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LCK内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏LCK的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了LCK基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。