Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
LC3B双切口酶质粒(m): sc-426563-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- LC3B 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- LC3B双切酶质粒（m）和LC3B双切酶质粒（m2）编码针对Map1lc3b的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：LC3B: sc-376404，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
LC3B双切口酶质粒(m) | sc-426563-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
LC3B双切口酶质粒(m2) | sc-426563-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Map1lc3b 基因编码微管相关蛋白 1 轻链 3 β（LC3B），它是自噬机制的核心组分，会发生脂质化形成 LC3-II，并与自噬体膜结合。LC3B 通过与含有 LIR 基序的受体（如 p62/SQSTM1）相互作用，促进吞噬泡（phagophore）扩展、自噬体成熟以及选择性货物的周转，从而将泛素化底物连接到自噬隔离过程。作为广泛使用的自噬通量标志物，LC3B 处于依赖溶酶体的蛋白质稳态通路的中心，这些通路与线粒体质量控制、先天免疫信号传导以及细胞应激反应相互交织。LC3B 相关自噬的失调已被认为与神经退行性变、炎症状态、感染生物学以及癌细胞适应等相关机制有关，因此 Map1lc3b 常被用作通路研究与干预的靶点。
LC3B 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Map1lc3b 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Map1lc3b内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Map1lc3b的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Map1lc3b基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。