Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LC3B双切口酶质粒(h): sc-417828-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- LC3B 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- LC3B双切酶质粒（h）和LC3B双切酶质粒（h2）编码针对MAP1LC3B的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
LC3B双切口酶质粒(h) | sc-417828-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LC3B双切口酶质粒(h2) | sc-417828-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAP1LC3B 编码微管相关蛋白1A/1B轻链3B（LC3B）。LC3B 是自噬机制的核心组成部分，在 ATG7/ATG3 依赖的脂质化作用下形成 LC3-II，并定位于自噬体膜上。LC3B 通过选择性自噬受体（如 p62/SQSTM1）中的 LC3 相互作用区（LIR）基序介导的结合，促进隔离膜（phagophore）的延伸与货物捕获，将被泛素化的底物与自噬体形成过程连接起来。通过这些相互作用，LC3B 整合营养感知与应激反应通路（包括 mTOR 和 AMPK 信号），从而调控蛋白质稳态与细胞器质量控制。LC3B 相关自噬的失调与神经退行性变、感染生物学、代谢功能障碍以及癌症相关的应激适应有关，因此 LC3B 既是自噬研究中常用的标志物，也是重要的机制节点。
LC3B 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 MAP1LC3B 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MAP1LC3B内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏MAP1LC3B的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了MAP1LC3B基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。