非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
LAP2 抗体 (3A3): sc-81610. HeLa 细胞全细胞裂解液中 LAP2 表达的 Western 印迹分析。所用检测试剂：m-IgG Fc BP-HRP: sc-525409。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
LAP2双切口酶质粒(h): sc-403613-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- LAP2 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- LAP2双切酶质粒（h）和LAP2双切酶质粒（h2）编码针对TMPO的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：LAP2: sc-81610，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
LAP2双切口酶质粒(h) | sc-403613-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
LAP2双切口酶质粒(h2) | sc-403613-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 TMPO 基因编码核纤层相关多肽 2（lamina-associated polypeptide 2，LAP2），这是一种内核膜蛋白，能够与核纤层蛋白（lamins）和染色质结合，从而组织核结构并调控基因组稳定性。LAP2 的不同同工型参与核膜组装、核纤层—染色质锚定，以及有丝分裂后与细胞周期耦联的细胞核重建过程，进而影响转录程序和 DNA 复制时序。通过这些结构性与调控性作用，TMPO 与调控染色质组织、向细胞核的力学信号传导（mechanotransduction）以及核完整性维持等通路发生交叉。涉及 TMPO/LAP2 的核膜—染色质相互作用失调与异常核形态有关，并在核结构受扰的增殖性与退行性疾病机制研究中受到关注。
LAP2 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 TMPO 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TMPO内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏TMPO的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了TMPO基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。