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LangerinCRISPR激活质粒(h) | sc-401949-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
CD207 编码 Langerin(一种 C 型凝集素受体),在朗格汉斯细胞及相关树突状细胞亚群中高度表达,主要在上皮屏障处参与病原体识别与抗原捕获。Langerin 以 Ca²⁺ 依赖的方式结合糖类基序,并介导内吞进入 Birbeck 颗粒,从而塑造抗原加工与呈递程序,影响适应性免疫的启动。通过凝集素驱动的摄取及其向内体区室的转运,它与先天免疫感知和炎症信号发生交叉,进而调节细胞因子输出与 T 细胞极化。CD207/Langerin 表达变化或朗格汉斯细胞功能异常,与皮肤免疫稳态、过敏性炎症以及感染相关的屏障免疫应答研究密切相关。
Langerin CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性CD207的表达。
Langerin CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的CD207基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于CD207转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Langerin表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的CD207位点,并能够研究内源性位点上依赖于Langerin的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在CD207表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Langerin通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。