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LAMP-2慢病毒激活颗粒(m) | sc-421383-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
Lamp2 编码溶酶体相关膜糖蛋白 2(lysosome-associated membrane glycoprotein 2,LAMP-2)。LAMP-2 是溶酶体限制性膜的主要组成成分,有助于维持溶酶体完整性并支持膜运输过程。LAMP-2 是自噬-溶酶体通路的关键因子,参与伴侣介导的自噬以及自噬体与溶酶体融合等过程,从而影响蛋白质质量控制、细胞器更新和细胞应激反应。LAMP-2 活性异常会扰乱溶酶体功能和自噬通量,而这些过程与心肌细胞稳态、骨骼肌维持以及神经退行性病变机制密切相关。在小鼠研究体系中,Lamp2 常被用于探究溶酶体生物学、免疫代谢,以及大分子清除缺陷所带来的细胞后果。
LAMP-2 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Lamp2 表达。
LAMP-2 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Lamp2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性LAMP-2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Lamp2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。