Date published: 2026-7-25

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Lamin B2双切口酶质粒(m): sc-421446-NIC

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说明书
  • 针对种属:mouse
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • Lamin B2 双切口酶质粒(m)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • Lamin B2双切酶质粒(m)和Lamin B2双切酶质粒(m2)编码针对Lmnb2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:Lamin B2: sc-377379,通过WB, IF或者IHC分析
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    Lamin B2双切口酶质粒(m)

    sc-421446-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    Lamin B2双切口酶质粒(m2)

    sc-421446-NIC-2
    20 µg
    CNY3084.00

    小鼠 Lmnb2 编码核纤层蛋白 B2(lamin B2),它是核纤层的核心中间丝成分,为核膜提供结构支撑,并有助于组织核周边染色质。Lamin B2 参与核结构的维持、DNA 复制时序的调控以及有丝分裂后核膜的重建,将核纤层动态与细胞周期进程和基因组稳定性联系起来。通过与核纤层相关结构域(lamina-associated domains, LADs)的相互作用,它也参与转录调控与高阶染色质组织。Lamin B2 及相关核纤层成分的失调与核纤层病(laminopathies)以及更广泛的机制相关,包括细胞核脆弱性增加、基因表达程序改变和应激反应异常,这些机制常在发育与退行性病变研究中被关注。

    Lamin B2 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Lmnb2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Lmnb2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Lmnb2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Lmnb2基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。