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L-FABP双切口酶质粒(h) | sc-401554-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
L-FABP双切口酶质粒(h2) | sc-401554-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
FABP1 编码肝型脂肪酸结合蛋白(liver fatty acid–binding protein,L-FABP)。L-FABP 是一种在细胞质中高丰度表达的脂质伴侣蛋白,可结合长链脂肪酸、酰基辅酶A(acyl-CoA)、胆汁酸及其他疏水性配体,从而协调细胞内的转运与代谢。在肝细胞和肠上皮细胞中,L-FABP 促进脂肪酸摄取、β-氧化、甘油三酯的处理,以及与 PPAR 信号和氧化应激反应相关的脂质介导转录程序。通过影响脂质通量与炎症信号,FABP1 的活性与代谢稳态及细胞氧化还原平衡相互交织。FABP1 的表达或功能失调与肝脏脂质积累改变及对代谢性肝脏表型的易感性有关,因此是研究脂质驱动病理机制的一个有价值靶点。
L-FABP 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 FABP1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对FABP1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏FABP1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了FABP1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。