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Ksr-2慢病毒激活颗粒(h2) | sc-402872-LAC-2 | 200 µl | CNY3422.00 |
人类KSR2(Ras激酶抑制因子2)基因编码Ksr-2,这是一种支架/调控性假激酶,负责在RAS下游组织RAF–MEK–ERK信号传导,从而精细调节MAPK通路信号的强度、持续时间及亚细胞定位;Ksr-2还可通过与AMPK相关网络的相互作用整合细胞能量与营养状态信号,将生长因子信号与代谢稳态、线粒体功能以及对能量应激的适应性反应联系起来;遗传学与功能研究表明,KSR2的异常与能量平衡和神经内分泌调控障碍相关,包括重度肥胖和胰岛素抵抗,凸显其在协调信号传导与代谢方面的关键作用;KSR2基因编辑试剂可用于在相关的人源细胞模型中,对MAPK与AMPK串扰、通路重连以及细胞类型特异性调控机制进行解析。
Ksr-2 慢病毒激活颗粒(h2)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 KSR2 表达。
Ksr-2 慢病毒激活颗粒(h2)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在KSR2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Ksr-2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 KSR2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。