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KIF20A慢病毒激活颗粒(h) | sc-403194-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
KIF20A(驱动蛋白家族成员20A;MKLP2)是一种以微管为轨道的马达蛋白,对有丝分裂进程必不可少,在纺锤体组织、染色体分离以及胞质分裂中发挥关键作用。它协调中央纺锤体/中体的动态变化,并在功能上与细胞周期调控网络相关联,包括依赖 Aurora B 的信号传导以及由 RhoA 驱动的收缩环形成。在多种癌症背景下,KIF20A 表达失调与增殖表型及有丝分裂保真度改变有关,因此是研究细胞分裂压力与基因组不稳定性的一个有用节点。对 KIF20A 进行实验性调控有助于在人体细胞模型中探究有丝分裂退出、断裂分离(abscission)时序,以及微管–肌动蛋白的串扰。
KIF20A 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 KIF20A 表达。
KIF20A 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在KIF20A转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性KIF20A表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 KIF20A 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。