Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
KIAA0664 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-407383
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- KIAA0664 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在KIAA0664基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
KIAA0664 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-407383 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
CLUH（亦称 KIAA0664）编码一种细胞质 RNA 结合蛋白，通过调控核编码线粒体蛋白相关 mRNA 的稳定性、定位与翻译，将线粒体生物发生与线粒体的空间组织联系起来。它有助于维持氧化磷酸化能力和细胞能量稳态，并通过控制线粒体相关基因表达程序影响应激反应、代谢适应等过程。CLUH 相关的线粒体调控一旦受扰，可能导致呼吸功能紊乱、线粒体分布改变，并影响调控细胞生长与存活的通路。因此，CLUH 与线粒体功能障碍及代谢相关疾病机制研究密切相关，尤其适用于那些以生物能量学改变与细胞器动态异常为特征的研究情境。
KIAA0664 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中CLUH基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对CLUH基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏CLUH开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使KIAA0664蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建CLUH缺失的细胞模型，用于KIAA0664信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 KIAA0664 功能至关重要的 CLUH 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 CLUH 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 KIAA0664 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 KIAA0664 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 CLUH 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 KIAA0664 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 KIAA0664 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由CLUH同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定CLUH靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。