Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Keap1双切口酶质粒(h): sc-400190-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Keap1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Keap1双切酶质粒（h）和Keap1双切酶质粒（h2）编码针对KEAP1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Keap1: sc-365626，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Keap1双切口酶质粒(h) | sc-400190-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Keap1双切口酶质粒(h2) | sc-400190-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
KEAP1 编码 Keap1，它是一种位于细胞质的底物衔接蛋白，隶属于 CUL3–RBX1 E3 泛素连接酶复合体，用于控制 NRF2（NFE2L2）的蛋白酶体周转，从而精细调节抗氧化及亲电应激反应。Keap1 通过感知半胱氨酸残基的反应性修饰，将氧化还原稳态与转录程序相连接，这些转录程序调控解毒作用、谷胱甘肽代谢以及对外源性化合物的防御；同时，Keap1 还可通过 p62/SQSTM1 依赖性调控与自噬发生交叉。KEAP1–NRF2 轴的扰动会重塑细胞代谢与炎症信号传导，与氧化应激生物学及肿瘤发生相关的应激适应密切相关。KEAP1 功能失衡常在人类疾病模型中被研究，主要聚焦于 NRF2 靶基因表达改变、线粒体功能变化，以及对环境或代谢应激因子的耐受/抗性等方面。
Keap1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 KEAP1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对KEAP1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏KEAP1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了KEAP1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。