Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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karyopherin α1双切口酶质粒(h): sc-402324-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- karyopherin α1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- karyopherin α1双切酶质粒（h）和karyopherin α1双切酶质粒（h2）编码针对KPNA1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：karyopherin α1: sc-101292，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
karyopherin α1双切口酶质粒(h) | sc-402324-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
karyopherin α1双切口酶质粒(h2) | sc-402324-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
KPNA1 编码核转运蛋白 α1（karyopherin alpha 1，亦称 importin-α5），是经典核进口通路中的一种适配蛋白。它能够识别货物蛋白上的碱性核定位信号（NLS），并将其与 importin-β 连接起来，从而依赖 Ran GTP 酶，通过核孔复合体实现跨膜转运。通过调控核—胞质之间的运输，KPNA1 通过对转录因子和调控酶进入细胞核的受控访问，影响细胞周期进程、DNA 损伤信号传导、先天免疫的转录反应以及应激适应程序。importin 介导的转运发生异常，已与癌症以及神经退行性疾病和炎症相关情境中所见的信号网络失衡与基因表达状态重塑有关。KPNA1 也常用于研究宿主—病原体相互作用，因为病毒或细菌效应蛋白的核进口会影响其复制以及免疫逃逸机制。
karyopherin α1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 KPNA1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对KPNA1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏KPNA1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了KPNA1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。