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JMJD1BCRISPR激活质粒(h) | sc-404249-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
KDM3B(JMJD1B)编码一种含 JmjC 结构域的组蛋白去甲基化酶,主要去除具有抑制作用的 H3K9 甲基化标记,从而促进染色质可及性并激活转录。通过重塑表观遗传图谱,JMJD1B 影响谱系特异性的基因程序、细胞分化,以及在不同情境下对细胞增殖与应激反应的调控。其活性与更广泛的染色质调控网络相整合,并可调节信号依赖性的转录,将代谢与发育线索连接到基因表达输出。多种疾病背景中均有 KDM3B 失调的报道,使其成为研究人类细胞中表观遗传调控机制及异常转录状态的有用靶点。
JMJD1B CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性KDM3B的表达。
JMJD1B CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的KDM3B基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于KDM3B转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性JMJD1B表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的KDM3B位点,并能够研究内源性位点上依赖于JMJD1B的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在KDM3B表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟JMJD1B通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。