Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Western blot analysis of JAK3 expression in HeLa whole cell lysates (A,B). Antibodies tested include JAK3 Antibody (B-12): sc-6932 (A) and JAK3 (C-21): sc-513 (B).
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JAK3双切口酶质粒(h): sc-400835-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- JAK3 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- JAK3双切酶质粒（h）和JAK3双切酶质粒（h2）编码针对JAK3的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：JAK3: sc-6932，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
JAK3双切口酶质粒(h) | sc-400835-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
JAK3双切口酶质粒(h2) | sc-400835-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
Janus 激酶 3（JAK3）是一种非受体型酪氨酸激酶，主要表达于造血细胞谱系，可将细胞因子受体信号耦联至下游转录程序。JAK3 通过与 IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-15 和 IL-21 受体上的共同 γ 链（IL2RG）结合，磷酸化受体亚基并激活 STAT 因子，从而协调淋巴细胞的发育、增殖与分化。该通路还与包括 PI3K–AKT 和 MAPK 在内的更广泛免疫调控网络交叉，塑造效应功能与稳态。JAK3 信号失调及其遗传变异与免疫缺陷表型和异常免疫激活相关，因此 JAK3 是开展免疫学与炎症机制研究的关键节点。
JAK3 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 JAK3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对JAK3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏JAK3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了JAK3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。