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JAK2慢病毒激活颗粒(h) | sc-400246-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
Janus 激酶 2(JAK2)是一种非受体型酪氨酸激酶,可将来自细胞因子和生长因子受体的信号传递至下游 STAT 转录因子,从而协调调控造血、免疫细胞分化以及炎症反应的程序。在 JAK–STAT 通路中,JAK2 介导的磷酸化级联反应塑造细胞存活与增殖,并与 MAPK 及 PI3K/AKT 信号相互交叉,以精细调节不同情境下的特异性结局。JAK2 活性失调及信号动力学改变与骨髓增殖性肿瘤及其他血液系统疾病密切相关;此外,JAK2 依赖的网络重塑也在实体瘤生物学及免疫介导疾病模型中受到研究。作为信号网络的核心节点,JAK2 为解析受体近端的信号起始、转录输出以及反馈调控提供了一个可操作的切入点。
JAK2 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 JAK2 表达。
JAK2 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在JAK2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性JAK2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 JAK2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。