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JAK2双切口酶质粒(m) | sc-421200-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
JAK2双切口酶质粒(m2) | sc-421200-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Jak2 基因编码非受体型酪氨酸激酶 JAK2。JAK2 是细胞因子受体信号传导的核心介质,能够将配体与受体的结合事件耦联到 STAT 转录因子的磷酸化过程。JAK2 活性与 JAK–STAT、MAPK/ERK 以及 PI3K–AKT 等通路相互整合,从而调控造血、免疫细胞分化、炎症反应和代谢稳态。体内及细胞研究表明,Jak2 的扰动会导致促红细胞生成素与促血小板生成素应答改变、应激信号异常以及生长控制失衡,因此与骨髓增殖和免疫功能障碍相关的模型具有重要关联。作为信号枢纽,JAK2 常用于解析受体近端的激酶级联反应以及细胞因子下游的转录程序。
JAK2 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Jak2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Jak2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Jak2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Jak2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。