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Jagged2CRISPR激活质粒(h) | sc-401322-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
Jagged2CRISPR激活质粒(h2) | sc-401322-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
人类 JAG2 基因编码 Jagged2,这是一种锚定于细胞膜的 NOTCH 受体配体,通过接触依赖(juxtacrine)的信号传递来调控细胞命运决定、谱系承诺以及组织模式形成。由 Jagged2 驱动的 Notch 激活会影响调控增殖、分化与凋亡的转录程序,并与干细胞/祖细胞维持及发育过程密切相关。JAG2/Notch 信号失调与上皮和造血分化状态的改变有关,并已在致癌信号、免疫调节和发育性疾病等研究情境中得到探讨。作为通路中的关键节点,Jagged2 常被用于研究 Notch 依赖的与 Wnt、TGF-β 以及炎症信号网络之间的串扰。
Jagged2 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性JAG2的表达。
Jagged2 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的JAG2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于JAG2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Jagged2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的JAG2位点,并能够研究内源性位点上依赖于Jagged2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在JAG2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Jagged2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。