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Jagged1双切口酶质粒(h) | sc-400208-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Jagged1双切口酶质粒(h2) | sc-400208-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
JAG1 编码 Jagged1,这是一种跨膜配体,可激活 Notch 受体,从而调控接触依赖(juxtacrine)的信号传导,控制细胞命运决定、干/祖细胞维持以及组织模式形成。由 Jagged1 驱动的 Notch 信号通过 RBPJ/CSL 以及 HES、HEY 家族等下游靶基因影响转录程序,进而塑造包括血管生成、上皮–间质相互作用以及胆道与心血管发育在内的多种过程。JAG1/Notch 活性失调与包括 Alagille 综合征在内的先天发育异常有关,并可通过改变分化状态与微环境信号,在不同情境下参与肿瘤生物学过程。
Jagged1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 JAG1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对JAG1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏JAG1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了JAG1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。