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JAB1双切口酶质粒(h) | sc-401302-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
JAB1双切口酶质粒(h2) | sc-401302-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
COPS5 编码 JAB1(CSN5),它是 COP9 信号体的催化亚基,可通过去 NEDD8 化(deneddylation)调控 cullin-RING 泛素连接酶,从而塑造依赖泛素的蛋白质周转。通过调节关键细胞周期与应激反应调控因子的稳定性和活性,JAB1 影响 DNA 损伤应答、信号转导以及与增殖和分化相关的转录程序。JAB1 还与 AP-1 信号等通路以及协调细胞对环境线索适应的蛋白稳态网络发生交互。COPS5/JAB1 活性失调与生长控制异常和致癌表型相关,因此常被作为研究肿瘤相关信号与蛋白降解机制的重点对象。
JAB1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 COPS5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对COPS5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏COPS5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了COPS5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。