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ITI-H4双切口酶质粒(h) | sc-403358-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
ITI-H4双切口酶质粒(h2) | sc-403358-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
白细胞介素-α-胰蛋白酶抑制剂重链4(inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain 4,ITIH4)是一种肝脏高表达的分泌型糖蛋白,会在血浆中经历蛋白水解加工,并与炎症过程中细胞外环境的稳定维持相关。作为白细胞介素-α-胰蛋白酶抑制剂家族成员,ITIH4与急性期反应以及受蛋白酶调控的重塑过程有关,这些过程与凝血、补体活性以及细胞外基质稳态相互交织。已有研究在全身性炎症状态和多种癌症中观察到ITIH4丰度及其片段化模式的改变,支持其作为与生物标志物相关的研究靶点,用于机制层面的探究。研究ITIH4的功能有助于阐明循环中的蛋白酶网络与炎症信号如何共同塑造组织损伤反应以及肿瘤相关微环境的变化。
ITI-H4 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ITIH4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ITIH4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ITIH4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ITIH4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。