Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
ISYNA1 Antibody (C-9) Alexa Fluor® 647: sc-271830 AF647. Direct fluorescent western blot analysis of ISYNA1 expression in HCT-116 (A), Y79 (B), K-562 (C) and HEK293T (D) whole cell lysates and human testis tissue extract (E). Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
ISYNA1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-404785
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- ISYNA1 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在ISYNA1基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：ISYNA1: sc-271830，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
ISYNA1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-404785 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
ISYNA1（肌醇-3-磷酸合成酶1）编码一种限速酶，可将葡萄糖-6-磷酸转化为肌醇-3-磷酸，为从头合成肌醇（myo-inositol）生物合成提供关键入口。肌醇为磷脂酰肌醇（PI）及其磷酸化衍生物等磷脂酰肌醇信号脂质提供前体，这些信号脂质调控膜运输、受体偶联信号传导、细胞骨架动态以及细胞内钙稳态。通过参与PI/PI(4,5)P2/PI(3,4,5)P3的代谢，ISYNA1影响PI3K–AKT通路以及PLC驱动的信号等，从而塑造细胞增殖、应激反应与分化等过程。肌醇与磷脂酰肌醇衍生物稳态的紊乱已与代谢及神经发育相关表型有关，因此ISYNA1是研究信号传导与膜动态机制的一个有用靶点。
ISYNA1 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中ISYNA1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对ISYNA1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏ISYNA1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使ISYNA1蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建ISYNA1缺失的细胞模型，用于ISYNA1信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 ISYNA1 功能至关重要的 ISYNA1 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 ISYNA1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 ISYNA1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 ISYNA1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 ISYNA1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 ISYNA1 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 ISYNA1 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由ISYNA1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定ISYNA1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。