Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
IRSp53 Antibody (46): sc-136470. Western blot analysis of IRSp53 expression in untreated (A) and chemically-treated (B) K-562 whole cell lysates. β-Actin (C4): sc-47778 used as loading control. Detection reagent used: m-IgG Fc BP-HRP: sc-525409.
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IRSp53双切口酶质粒(h): sc-403072-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- IRSp53 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- IRSp53双切酶质粒（h）和IRSp53双切酶质粒（h2）编码针对BAIAP2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：IRSp53: sc-136470，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
IRSp53双切口酶质粒(h) | sc-403072-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
BAIAP2 编码 IRSp53，这是一种含 I-BAR 结构域的衔接蛋白，可通过协调 Rho 家族 GTPase 信号以及 WAVE、Mena/VASP 等肌动蛋白调控因子，把膜曲率感知与肌动蛋白细胞骨架重塑连接起来。IRSp53 参与支持丝状伪足（filopodia）和片状伪足（lamellipodia）的形成、内吞作用，以及依赖生长因子的通路，这些通路共同调控细胞迁移、黏附和神经突起生长。基于这些功能，BAIAP2 常在研究细胞骨架动态与膜运输如何塑造细胞行为的背景下被关注，包括神经发育和突触相关过程。IRSp53 相关网络的失调也被用于探讨细胞运动性与侵袭表型的改变，以及神经系统疾病的生物学机制。
IRSp53 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 BAIAP2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对BAIAP2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏BAIAP2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了BAIAP2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。