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IRS-2双切口酶质粒(h) | sc-400474-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
IRS-2双切口酶质粒(h2) | sc-400474-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
胰岛素受体底物2(IRS2)编码 IRS-2,这是一种对接适配蛋白,可将来自胰岛素和 IGF-1 受体的信号传递给下游效应因子,从而调控葡萄糖代谢、脂质稳态、细胞生长与存活。受体介导的酪氨酸磷酸化发生后,IRS-2 会招募 PI3K 等含 SH2 结构域的蛋白以激活 AKT/mTOR 信号,并与 RAS–MAPK 通路相互衔接,进而调控转录与代谢程序。IRS-2 的活性会影响胰岛素敏感性、肝脏糖异生以及脂肪细胞功能;IRS2 信号的改变与代谢功能障碍和胰岛素抵抗相关。IRS-2 依赖性信号失调也常在异常增殖和应激反应等背景中被研究,其中 PI3K–AKT 通路的重塑会促成与疾病相关的表型。
IRS-2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 IRS2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IRS2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏IRS2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了IRS2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。