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IRF3双切口酶质粒(h) | sc-417171-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
IRF3双切口酶质粒(h2) | sc-417171-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
干扰素调节因子3(IRF3)是一种广泛表达的转录因子,负责协调机体对病毒及胞质核酸感知所触发的早期先天免疫反应。作为多条模式识别受体通路(包括 cGAS–STING、RIG-I/MDA5–MAVS 以及 TLR3–TRIF)的下游效应分子,IRF3 被 TBK1/IKKε 磷酸化后发生二聚化,并转位进入细胞核,诱导 I 型干扰素及干扰素刺激基因的表达。通过这一程序,IRF3 调控抗病毒限制机制、与 NF-κB 的炎症信号串扰,以及细胞应激结局(如凋亡)。IRF3 活性失衡与感染过程中的异常干扰素信号、自身炎症表型以及肿瘤—免疫相互作用等现象相关,因此成为先天免疫机制研究中的关键枢纽节点。
IRF3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 IRF3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IRF3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏IRF3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了IRF3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。