Date published: 2026-7-25

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IRF3双切口酶质粒(h): sc-417171-NIC

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • IRF3 双切口酶质粒(h)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • IRF3双切酶质粒(h)和IRF3双切酶质粒(h2)编码针对IRF3的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:IRF3: sc-33641,通过WB, IF或者IHC分析
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    IRF3双切口酶质粒(h)

    sc-417171-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    IRF3双切口酶质粒(h2)

    sc-417171-NIC-2
    20 µg
    CNY3084.00

    干扰素调节因子3(IRF3)是一种广泛表达的转录因子,负责协调机体对病毒及胞质核酸感知所触发的早期先天免疫反应。作为多条模式识别受体通路(包括 cGAS–STING、RIG-I/MDA5–MAVS 以及 TLR3–TRIF)的下游效应分子,IRF3 被 TBK1/IKKε 磷酸化后发生二聚化,并转位进入细胞核,诱导 I 型干扰素及干扰素刺激基因的表达。通过这一程序,IRF3 调控抗病毒限制机制、与 NF-κB 的炎症信号串扰,以及细胞应激结局(如凋亡)。IRF3 活性失衡与感染过程中的异常干扰素信号、自身炎症表型以及肿瘤—免疫相互作用等现象相关,因此成为先天免疫机制研究中的关键枢纽节点。

    IRF3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 IRF3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IRF3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏IRF3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了IRF3基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。