Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IRE1α双切口酶质粒(h): sc-400576-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- IRE1α 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- IRE1α双切酶质粒（h）和IRE1α双切酶质粒（h2）编码针对ERN1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：IRE1α: sc-390960，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
IRE1α双切口酶质粒(h) | sc-400576-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
IRE1α双切口酶质粒(h2) | sc-400576-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ERN1 编码肌醇需求酶1α（IRE1α），这是一种定位于内质网（ER）的跨膜激酶/内切核糖核酸酶，是未折叠蛋白的主要感应器，也是未折叠蛋白反应（UPR）的核心枢纽。发生内质网应激时，IRE1α 发生寡聚化并激活其 RNase 活性，介导 XBP1 mRNA 的剪接以及 IRE1 依赖性调控降解（RIDD），从而重塑调控蛋白质稳态、分泌能力、炎症与细胞凋亡的转录与翻译程序。通过与 PERK 和 ATF6 信号的串扰，并进一步调动 JNK 和 NF-κB 通路，ERN1 还会影响先天免疫信号与代谢适应。IRE1α–XBP1 活性失调与多种以慢性内质网应激为特征的疾病相关，包括癌细胞生存程序、神经退行性变、糖尿病及炎症性疾病，因此常被作为机制研究的共同靶点。
IRE1α 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 ERN1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ERN1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏ERN1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了ERN1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。