Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
IRAK-M Antibody (XX-6): sc-100389. Western blot analysis of IRAK-M expression in HL-60 whole cell lysate.
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IRAK-M双切口酶质粒(h): sc-403219-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- IRAK-M 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- IRAK-M双切酶质粒（h）和IRAK-M双切酶质粒（h2）编码针对IRAK3的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：IRAK-M: sc-100389，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
IRAK-M双切口酶质粒(h) | sc-403219-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
IRAK-M双切口酶质粒(h2) | sc-403219-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 IRAK3 基因编码 IRAK-M，这是一种具有激酶样结构的衔接蛋白，在先天免疫细胞中作为 Toll 样受体（TLR）和 IL-1 受体信号通路的负调控因子发挥作用。通过抑制 MyD88 依赖性信号传导，IRAK-M 限制下游 NF-κB 和 MAPK 的激活，并有助于塑造细胞因子输出、内毒素耐受以及炎症反应的消退。IRAK-M 的活性与巨噬细胞极化及抗微生物程序的调控相关，整合影响组织炎症和免疫稳态的多种信号。IRAK3/IRAK-M 表达失调与炎症信号异常有关，见于脓毒症、慢性感染、自身免疫性炎症以及肿瘤相关髓系免疫抑制等情境。
IRAK-M 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 IRAK3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IRAK3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏IRAK3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了IRAK3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。