IP3R-III慢病毒激活颗粒(m): sc-421194-LAC

Itpr3 编码肌醇 1,4,5-三磷酸受体3型（IP3R-III），这是一种位于内质网上的 Ca²⁺ 释放通道；在 GPCR 和受体酪氨酸激酶信号通路下游，PLC 生成的 IP3 可激活该通道。IP3R-III 介导的 Ca²⁺ 瞬变可调控多种过程，包括分泌、上皮转运、线粒体生物能，以及通过钙调神经磷酸酶–NFAT 和 CaMK 等通路介导的 Ca²⁺ 依赖性基因表达。在小鼠组织中，IP3R-III 的表达富集于上皮与分泌相关谱系，有助于开展关于极性 Ca²⁺ 信号、内质网–线粒体接触位点以及刺激耦联钙振荡的研究。IP3R-III 活性与 Ca²⁺ 稳态的失调与细胞应激反应及疾病相关表型（涉及上皮功能障碍与异常增殖信号）有关，因此 Itpr3 可作为机制建模中的一个有用节点。

IP3R-III 慢病毒激活颗粒（m）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Itpr3 表达。

IP3R-III 慢病毒激活颗粒（m）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在Itpr3转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性IP3R-III表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 Itpr3 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。