Integrin α9/ITGA9CRISPR激活质粒(h): sc-402221-ACT

ITGA9 编码整合素 α9（integrin α9），这是一种 α 亚基，可与整合素 β1 形成异源二聚体，构成细胞表面受体，介导细胞与细胞外基质（ECM）配体（如 tenascin-C、骨桥蛋白 osteopontin 以及 VCAM1）的黏附。整合素 α9β1 的信号传导通过涉及 FAK/SRC、PI3K–AKT 和 Rho 家族 GTP 酶等通路，协调细胞骨架重塑、黏着斑（focal adhesion）动态变化以及细胞迁移，从而影响组织重塑与炎症细胞运输。ITGA9 的活性与血管生成、创伤修复和淋巴管瓣膜发育等过程相关，其表达改变也常在纤维化、慢性炎症以及肿瘤细胞侵袭性等研究背景中被关注。作为与机械转导相关的受体，整合素 α9 为研究 ECM 组成与硬度如何塑造细胞行为提供了一个有用切入点。

Integrin α9/ITGA9 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性ITGA9的表达。

Integrin α9/ITGA9 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的ITGA9基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于ITGA9转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Integrin α9/ITGA9表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的ITGA9位点，并能够研究内源性位点上依赖于Integrin α9/ITGA9的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在ITGA9表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Integrin α9/ITGA9通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。