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Integrin β4/ITGB4/CD104双切口酶质粒(h) | sc-400573-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Integrin β4/ITGB4/CD104双切口酶质粒(h2) | sc-400573-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ITGB4 编码整合素 β4(CD104),这是一种跨膜黏附受体,主要与整合素 α6 配对形成 α6β4,是半桥粒(hemidesmosomes)的核心组成部分。半桥粒通过与层粘连蛋白(laminins)相互作用,将上皮细胞连接到基底膜。通过与中间丝的耦联,并与黏着斑及生长因子信号发生串话(crosstalk),ITGB4 调控细胞极性、细胞骨架组织与迁移,并进一步影响 PI3K–AKT、MAPK 以及依赖 Rho GTPase 的下游通路。在多种癌症背景中,ITGB4 的表达或定位异常与上皮完整性失调及侵袭性增强有关;其致病性变异还与因真皮–表皮黏附受损而导致的起疱性疾病相关。这些生物学特征使 ITGB4 成为研究依赖黏附的信号传导、上皮重塑以及细胞外基质驱动表型的有用靶点。
Integrin β4/ITGB4/CD104 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ITGB4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ITGB4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ITGB4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ITGB4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。