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IL-4I1慢病毒激活颗粒(m) | sc-420354-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
小鼠 Il4i1 基因编码 IL-4I1,这是一种分泌型 L-氨基酸氧化酶,主要由抗原呈递细胞表达,可通过氨基酸分解代谢与氧化还原信号调控免疫稳态。IL-4I1 通过氧化 L-苯丙氨酸等底物产生过氧化氢及相关代谢产物,从而在炎症微环境中影响 T 细胞激活阈值、细胞因子程序以及髓系细胞功能。Il4i1 的活性与调控抗原驱动的适应性免疫、氧化应激反应以及效应性与调节性免疫状态的代谢调控等通路相互交织。IL-4I1 表达失衡与感染、自身免疫以及肿瘤相关免疫逃逸等情境中的免疫抑制改变和炎症重塑有关,因此可作为免疫代谢研究中的关键机制节点。
IL-4I1 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Il4i1 表达。
IL-4I1 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Il4i1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性IL-4I1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Il4i1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。