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IL-2RγCRISPR激活质粒(h) | sc-401876-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
IL2RG 编码共同 γ 链(IL-2Rγ,CD132),是多种细胞因子受体共享的信号转导亚基,包括 IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-15 和 IL-21。细胞因子与受体结合后,IL-2Rγ 与其他受体链协同触发 JAK1/JAK3 的激活及下游 STAT 信号传导,从而协调淋巴细胞的发育、生存与效应分化。该通路是 T 细胞、NK 细胞和 B 细胞生物学的核心,并通过对细胞因子反应性的转录程序塑造更广泛的免疫稳态。IL2RG 相关信号的破坏或失调与严重的免疫缺陷表型相关,也为研究人类免疫细胞中细胞因子网络依赖性提供了一个可操作的关键轴线。
IL-2Rγ CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性IL2RG的表达。
IL-2Rγ CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的IL2RG基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于IL2RG转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性IL-2Rγ表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的IL2RG位点,并能够研究内源性位点上依赖于IL-2Rγ的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在IL2RG表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟IL-2Rγ通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。