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IL-21CRISPR激活质粒(h) | sc-416409-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
IL-21CRISPR激活质粒(h2) | sc-416409-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
人类 IL21 基因编码白细胞介素-21(IL-21),这是一种多效性细胞因子,主要由活化的 CD4+ T 细胞亚群产生,例如滤泡辅助性 T(Tfh)细胞和 Th17 细胞。IL-21 通过 IL-21 受体与共同 γ 链组成的复合体进行信号传导,激活 JAK/STAT 通路,其中以 STAT3 依赖的转录程序尤为突出,可调控 B 细胞类别转换与浆细胞分化、增强 CD8+ T 细胞功能,并调节 NK 细胞的细胞毒活性。通过协同生发中心动态变化与外周免疫效应反应,IL-21 参与维持免疫稳态并推动炎症性重塑。IL-21 的表达或信号传导失调常在自身免疫、慢性炎症、感染相关免疫功能障碍以及肿瘤免疫学等研究背景中被重点关注,被视为决定淋巴细胞分化与细胞因子网络平衡的重要因素。
IL-21 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性IL21的表达。
IL-21 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的IL21基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于IL21转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性IL-21表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的IL21位点,并能够研究内源性位点上依赖于IL-21的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在IL21表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟IL-21通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。