Date published: 2026-7-25

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IL-1ra CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-401313

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • IL-1ra CRISPR/Cas9 基因敲除(KO)质粒(h) 是一组质粒混合物,每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA(gRNA),其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列,旨在实现最高的基因敲除效率
  • gRNA序列引导Cas9在IL-1ra基因组位点诱导位点特异性双链断裂(DSBs),从而通过非同源末端连接(NHEJ)实现基因敲除
  • 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点,因此在建立稳定的基因敲除细胞系后,可以通过 Cre 重组酶(Cre 向量:sc-418923)去除选择标记。
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:IL-1ra: sc-374084,通过WB, IF或者IHC分析
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    IL-1ra CRISPR/Cas9 KO质粒 (h)

    sc-401313
    20 µg
    CNY2986.00

    概述

    人类 IL1RN 基因编码白细胞介素-1 受体拮抗剂(IL-1ra)。IL-1ra 是一种分泌型调控因子,可通过竞争性抑制 IL-1α 和 IL-1β 与 I 型 IL-1 受体(IL-1 receptor type I)的结合,从而减弱下游依赖 MyD88 的信号传导。IL-1ra 通过限制 IL-1 驱动的 NF-κB 与 MAPK 通路激活,调控控制细胞因子产生、白细胞募集以及急性期炎症反应的转录程序。IL1RN 活性失衡与异常的先天免疫信号传导及炎症阈值改变相关,因此与自炎症、关节炎相关通路以及更广泛的细胞因子网络调控研究密切相关。IL1RN 也常作为标志性节点,用于探究巨噬细胞、上皮细胞和基质细胞等不同细胞区室中炎症小体–IL-1 轴的动态变化及反馈调控。

    IL-1ra CRISPR/Cas9 KO质粒(h)是一组旨在针对性地破坏human细胞系中IL1RN基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA(sgRNA),该sgRNA针对IL1RN基因内的特定位点,并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP,可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

    多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后,产生破坏IL1RN开放阅读框的插入或缺失(indels)的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接(NHEJ)途径修复,通常会导致移码突变,从而使IL-1ra蛋白表达失活。

    该CRISPR敲除系统能够高效构建IL1RN缺失的细胞模型,用于IL-1ra信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

    主要特点

    • 针对对 IL-1ra 功能至关重要的 IL1RN 外显子的 sgRNA
      通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
      GFP 报告基因用于识别转染细胞
      针对多个 IL1RN 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
      兼容转染递送

    设计变体

    CRISPRs +/- HDR

    • 由 IL-1ra CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 IL-1ra CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 IL1RN 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
      由 IL-1ra HDR 质粒(h)编码的 HDR 供体构建体以及 IL-1ra HDR质粒(h2)编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因,其两侧由IL1RN同源臂包围,以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定IL1RN靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。