Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
IL-12Rβ2 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-406442
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- IL-12Rβ2 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在IL-12Rβ2基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：IL-12Rβ2: sc-293379，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
IL-12Rβ2 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-406442 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
IL12RB2 编码白细胞介素-12受体β2链（IL-12Rβ2）。它是一种信号转导亚基，与 IL-12Rβ1 配对，在 T 细胞和 NK 细胞表面形成具有功能的 IL-12 受体复合物。IL-12 与受体结合后，可激活依赖 JAK2/TYK2 的 STAT4 信号通路，促进 Th1 极化、IFN-γ 产生以及细胞毒性免疫程序，从而塑造细胞介导的免疫反应。IL-12Rβ2 的表达水平及其信号传导能力会影响炎症与肿瘤相关免疫微环境中的分化过程和效应功能，使该轴与免疫失衡以及抗病原体或抗肿瘤反应的改变相关联。在慢性炎症、免疫逃逸以及因 STAT4 驱动的转录网络受损而导致的感染易感性等背景下，IL12RB2 活性失调已受到研究关注。
IL-12Rβ2 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中IL12RB2基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对IL12RB2基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏IL12RB2开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使IL-12Rβ2蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建IL12RB2缺失的细胞模型，用于IL-12Rβ2信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 IL-12Rβ2 功能至关重要的 IL12RB2 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 IL12RB2 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 IL-12Rβ2 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 IL-12Rβ2 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 IL12RB2 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 IL-12Rβ2 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 IL-12Rβ2 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由IL12RB2同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定IL12RB2靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。