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IGFBP6CRISPR激活质粒(h) | sc-404768-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
IGFBP6 编码胰岛素样生长因子结合蛋白 6(IGFBP-6),是一种分泌型糖蛋白,优先与 IGF‑II 结合,并通过影响其生物可利用性、受体结合及下游信号传导(如 PI3K–AKT 和 MAPK/ERK 通路)来调控其作用。通过调节依赖 IGF 的生长、存活和分化信号,IGFBP6 在多种器官环境中参与维持组织稳态并介导细胞应激反应。在多种肿瘤与代谢研究中均有报道 IGFBP6 表达发生改变,它可影响与 IGF 信号失衡相关的增殖、迁移和凋亡等表型。作为一种可溶性的细胞外调控因子,IGFBP6 也因其对肿瘤微环境中的旁分泌通讯,以及在发育与内分泌生物学模型中的作用而受到研究关注。
IGFBP6 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性IGFBP6的表达。
IGFBP6 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的IGFBP6基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于IGFBP6转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性IGFBP6表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的IGFBP6位点,并能够研究内源性位点上依赖于IGFBP6的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在IGFBP6表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟IGFBP6通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。