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IGFBP5双切口酶质粒(m) | sc-421066-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
IGFBP5双切口酶质粒(m2) | sc-421066-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Igfbp5 编码胰岛素样生长因子结合蛋白 5(IGFBP5)。IGFBP5 是一种分泌型并与细胞外基质(ECM)相关的调控因子,可调节 IGF-I/IGF-II 的生物可利用性,并通过 IGF1R–PI3K/AKT 和 MAPK 通路影响其信号传导。除对 IGF 的结合与“封存”外,IGFBP5 还可通过与 ECM 组分相互作用及在特定情境下的 IGF 非依赖性活性,影响细胞黏附、迁移与存活。Igfbp5 的表达与肌生成、成骨以及成纤维细胞激活等组织重塑过程相关,因此在纤维化、创伤修复和骨骼发育研究中具有重要意义。IGFBP5 的失调与肿瘤微环境中的增殖与分化程序改变以及间质重塑相关,支持其作为生长因子信号研究中的关键机制节点。
IGFBP5 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Igfbp5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Igfbp5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Igfbp5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Igfbp5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。