ICMTCRISPR激活质粒(h): sc-406029-ACT
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- ICMT CRISPER激活质粒（h）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- ICMT CRISPR 激活质粒 (h)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 ICMT CRISPR 激活质粒 (h) 和 ICMT CRISPR 激活质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别针对 ICMT 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
ICMTCRISPR激活质粒(h) | sc-406029-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
ICMTCRISPR激活质粒(h2) | sc-406029-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
人源 ICMT（异戊烯基半胱氨酸羧基甲基转移酶）是一种定位于内质网的酶，在 CAAX 基序蛋白经由异戊烯化与蛋白水解处理之后，催化其 C 末端异戊烯基半胱氨酸的甲基酯化。该异戊烯化后的加工步骤可调控多种异戊烯化底物的膜亲和性、亚细胞转运以及信号输出，其中包括参与生长因子与应激反应通路的小 GTP 酶。通过塑造异戊烯化信号蛋白的定位与功能，ICMT 将脂质修饰网络与细胞增殖、分化及细胞骨架动力学的调控联系起来。异戊烯化依赖的信号异常与致癌转化以及其他细胞信号失调和蛋白错位相关疾病有关，因此 ICMT 是开展机制研究的一个有价值节点。
ICMT CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性ICMT的表达。
ICMT CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的ICMT基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于ICMT转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性ICMT表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的ICMT位点，并能够研究内源性位点上依赖于ICMT的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在ICMT表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟ICMT通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。