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HtrA2双切口酶质粒(h) | sc-402576-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
HTRA2 编码 HtrA2(又称 Omi),是一种线粒体丝氨酸蛋白酶,参与蛋白质质量控制和线粒体稳态的维持。在细胞受到应激后,HtrA2 可释放到细胞质中,通过拮抗凋亡抑制蛋白(IAPs)并影响半胱天冬酶(caspase)的激活来调控细胞凋亡。该蛋白还与线粒体动力学、未折叠蛋白应激反应以及影响细胞生存决策的蛋白质稳态(proteostasis)通路相关。HTRA2 活性或表达失调与神经退行性变等多种疾病有关,这些疾病通常伴随线粒体功能障碍和凋亡信号异常。
HtrA2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HTRA2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HTRA2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HTRA2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HTRA2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。