Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Simultaneous near-infrared western blot analysis of β-Actin expression, detected with β-Actin (C4): sc-47778 and m-IgGκ BP-CFL 680: sc-516180 and HSP 70/HSC 70 expression, detected with HSP 70/HSC 70 Antibody (W27): sc-24 and m-IgGλ BP-CFL 790: sc-516195 in HeLa (A), DU 145 (B), MCF7 (C), MDA-MB-231 (D), HCT-116 (E) and HUV-EC-C (F) whole cell lysates.
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HSPA8/HSC70双切口酶质粒(h): sc-418508-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- HSPA8/HSC70 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- HSPA8/HSC70双切酶质粒（h）和HSPA8/HSC70双切酶质粒（h2）编码针对HSPA8的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：HSPA8/HSC70: sc-7298，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
HSPA8/HSC70双切口酶质粒(h) | sc-418508-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
HSPA8/HSC70双切口酶质粒(h2) | sc-418508-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
HSPA8 编码持续性表达的分子伴侣 HSC70。HSC70 是 HSP70 家族的核心成员，能够结合新生肽链或在应激下变性/去折叠的多肽，促进其正确折叠与重新折叠，并防止蛋白聚集。HSC70 与 DNAJ 类共伴侣及核苷酸交换因子等共同参与 ATP 依赖性的伴侣循环，在细胞质及细胞器范围内维持蛋白质稳态。它同时还是伴侣介导自噬、内吞过程中网格蛋白（clathrin）去包被，以及包括泛素–蛋白酶体降解在内的蛋白质质量控制通路的重要调控因子。HSPA8/HSC70 相关的蛋白稳态与细胞内运输一旦失衡，已被认为与神经退行性疾病、肿瘤细胞的应激耐受以及感染性疾病生物学有关，因此是细胞稳态网络中被广泛研究的关键节点。
HSPA8/HSC70 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 HSPA8 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HSPA8内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏HSPA8的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了HSPA8基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。