非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
HSC 70 抗体 (B-6): sc-7298. 对 HeLa 全细胞裂解液中 HSC 70 的表达进行 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
HSPA8/HSC70 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-418508
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- HSPA8/HSC70 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在HSPA8/HSC70基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：HSPA8/HSC70: sc-7298，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
HSPA8/HSC70 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-418508 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
HSPA8（HSC70）是一种持续表达的 HSP70 家族分子伴侣蛋白，通过促进 ATP 依赖性的折叠、再折叠以及对新生或应激损伤蛋白的分流处置（triage），来维持蛋白质稳态。它参与多种蛋白质质量控制通路，包括通过溶酶体受体 LAMP2A 介导的伴侣介导自噬（CMA）、内吞作用与网格蛋白（clathrin）解包被，以及应激颗粒动态的调控，从而影响细胞对蛋白毒性和代谢应激的响应。通过与共伴侣蛋白及泛素–蛋白酶体系统的相互作用，HSPA8 有助于调控蛋白质周转、细胞器稳态以及不同细胞类型中的信号传导稳健性。HSPA8 相关伴侣网络的失调与蛋白聚集相关生物学，以及在神经退行性疾病和肿瘤研究中观察到的应激适应程序改变有关。
HSPA8/HSC70 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中HSPA8基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对HSPA8基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏HSPA8开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使HSPA8/HSC70蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建HSPA8缺失的细胞模型，用于HSPA8/HSC70信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 HSPA8/HSC70 功能至关重要的 HSPA8 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 HSPA8 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 HSPA8/HSC70 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 HSPA8/HSC70 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 HSPA8 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 HSPA8/HSC70 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 HSPA8/HSC70 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由HSPA8同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定HSPA8靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。