Date published: 2026-7-21

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HSP 105双切口酶质粒(h): sc-402155-NIC

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • HSP 105 双切口酶质粒(h)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • HSP 105双切酶质粒(h)和HSP 105双切酶质粒(h2)编码针对HSPH1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:HSP 105: sc-74550,通过WB, IF或者IHC分析
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    HSP 105双切口酶质粒(h)

    sc-402155-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    HSP 105双切口酶质粒(h2)

    sc-402155-NIC-2
    20 µg
    CNY3084.00

    HSPH1 编码热休克蛋白 HSP105,这是一种高分子量分子伴侣,在蛋白毒性应激条件下被诱导表达,可帮助防止蛋白质聚集,并在细胞质中促进错误折叠底物的重新折叠。HSP105 与 HSP70/HSP40 伴侣系统协同作用,参与与热休克反应、泛素–蛋白酶体功能以及细胞在热应激或氧化应激后的恢复相关的蛋白质稳态网络。通过在应激下稳定蛋白质,HSPH1 会影响细胞对凋亡的抗性、细胞周期进程以及应激适应性信号程序。伴侣功能失调及 HSPH1 表达升高与恶性转化等蛋白质稳态失衡状态有关,因此在研究应激耐受机制与蛋白质质量控制方面具有重要意义。

    HSP 105 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HSPH1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HSPH1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HSPH1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HSPH1基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。