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HSF4双切口酶质粒(h) | sc-403850-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
HSF4双切口酶质粒(h2) | sc-403850-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
HSF4(热休克转录因子4)是一种具有DNA结合能力的转录因子,通过调控热休克蛋白及其他应激反应基因来协同维持蛋白质稳态(proteostasis),并在细胞分化程序中发挥重要作用。在眼部组织中,HSF4促进晶状体纤维细胞的成熟并维持蛋白质稳态;这些过程与细胞骨架组织、分子伴侣网络以及防止蛋白质聚集密切相关。HSF4活性失调与遗传性晶状体混浊及白内障相关表型有关,反映出晶状体对蛋白质质量控制扰动的高度敏感性。作为应激反应转录调控网络中的关键节点,HSF4常被用于研究其对细胞状态转换、蛋白毒性应激下的转录调控,以及下游分子伴侣表达谱的影响。
HSF4 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HSF4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HSF4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HSF4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HSF4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。