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HSF1双切口酶质粒(m) | sc-420971-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
HSF1双切口酶质粒(m2) | sc-420971-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
热休克因子1(HSF1)由小鼠 Hsf1 基因编码,是热休克反应的主调控转录因子,在热应激和蛋白毒性应激条件下维持蛋白质稳态。HSF1 被激活后会三聚化,并与热休克元件结合,从而诱导 HSP70、HSP90 等分子伴侣表达,协调蛋白质折叠、质量控制以及细胞损伤后的恢复。HSF1 还与调控蛋白质稳态、自噬、凋亡和代谢适应的通路整合,塑造细胞在压力下的生存能力。HSF1 活性失调与神经退行性变、衰老、炎症以及癌症相关的应激程序等过程有关,因此在小鼠模型的机制研究中是一个关键节点。
HSF1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Hsf1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Hsf1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Hsf1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Hsf1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。